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技術文章(zhang)

大鼠腦立體定位儀實驗操作指導

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 先了解下某些顱外標記與顱內結構具有相對固定的位置關系。
1.前囟(bregma):位于冠狀縫和矢狀縫的交接處
2.人字縫尖(ambda):位于后囟人字縫與矢狀縫交會點

儀器使用所需材料:
大鼠,立體定位儀,哺乳類手術器械,牙科鉆,20%氨基甲酸乙酯,生理鹽水,2%滂胺天藍溶液
測試方法:
麻醉(zui):20%氨(an)基甲(jia)酸乙酯0.6 ml/100g, i.p.
固定:將(jiang)大鼠頭(tou)部固定于(yu)腦立體定位(wei)儀(yi).上,門齒桿(gan)-3.3mm ;3個標準檢測是否(fou)固定成(cheng)功(鼻對正中,頭(tou)部不(bu)動,提(ti)尾(wei)不(bu)掉);切頭(tou)皮(pi),剝開皮(pi)下組織,將(jiang)骨縫(feng)暴露(lu)清晰,用鉛筆在前囟和(he)后(hou)囟各做(zuo)一-標志(zhi).;核(he)團(tuan)定位(wei),做(zuo)標志(zhi),鉆孔;LV(AP: -1.3 R 2.0 H: 3.5)mm
小心安 放微量(liang)注射器,針(zhen)尖斜面中點進(jin)入孔內時,記高度。緩慢(man)進(jin)針(zhen)至LV ,注入10 μl 2%滂胺天藍溶(rong)液(2 μl/min),留針(zhen)10 min后緩慢(man)拔針(zhen)
確(que)定注射位置:
取下動物(wu)(wu),腹腔注射過(guo)量的20%氨基甲(jia)酸乙酯使動物(wu)(wu)死亡。
以咬骨鉗咬開顱骨,小心取出(chu)大腦,順著注射(she)點將大腦切開,觀察染料是否在側腦室內

需要注意的是:
■立體定位(wei)儀為精密儀器,實驗時應小心操.作,以免(mian)損壞(huai)
■微量(liang)注(zhu)射器取出后應立即清洗,以防堵塞(sai)
 
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